Средоварка

Сайт о промышленной биотехнологии

Понедельник, 21.01.2019, 02:15
Меню сайта
Категории раздела
Строение клетки [2]
Микроорганизмы [4]
Стерилизация [6]
Питательные среды [4]
Практические занятия [7]
Статистика

Онлайн всего: 1
Гостей: 1
Пользователей: 0
Главная » Статьи » Микробиология » Практические занятия

Обращение с микроскопом

Обращение с микроскопом

Стерилизация. Автоклав
Получение чистых культур
Свечение микробов. Разложение белков и углеводов
Части клетки. Окраска по Граму
Рассмотрение посевов. Бактерии, грибы, простейшие
Пересев. Приготовление мазков

 

Обращение с микроскопом. Сложный микроскоп, его устройство и обращение с ним предполагается известным ввиду предшествующей отработки студентами, изучающими микробиологию, общей биологии и гистологии (гистогенеза) с эмбриологией.

В силу этого в нашу задачу входит лишь ознакомление с оптической системой (объективом) называемой гомогенной иммерсионной (погружной — масляной), без которой ни отчетливое обнаружение микроорганизмов, ни их изучение как правило невозможно и которая обычно не входит в набор объективов, необходимых при биологических или гистологических студенческих занятиях.

Обнаружить подавляющее большинство патогенных микроорганизмов даже при помощи самых сильных сухих систем невозможно в силу того, что величина микробов близка, а некоторых, самых мельчайших из них, находится даже на границе разрешающей силы наиболее совершенных микроскопических объективов (иммерсионных), каковыми сухие объективы не являются, в силу того, что их нумерическая апертура слишком мала.

Нумерическая апертура объектива микроскопа, которой и определяется разрешающая сила оптической системы, выражается формулой: n×sin(a/2), где n — показатель преломления той среды, которая находится между покровным или предметным стеклом и передней чечевицей (линзой) объектива, а a/2 — половина угла, образованного пучком лучей, идущих от исследуемого объекта и проходящего через объектив.


Так как при употреблении обыкновенных сухих объективов между передней чечевицей объектива и препаратом находится воздух, показатель преломления которого равен 1, то нумерическая апертура сухих систем никогда не может быть больше 1 (см. указанную выше формулу). Отсюда следует, что для увеличения нумерической апертуры, что влечет за собой повышение разрешающей силы объектива, между препаратом и объективом должна быть внесена среда с более сильным показателем преломления, превышающим 1, т. е. та или иная жидкость.

Такой жидкостью служит кедровое масло с показателем преломления, равным 1,51, каплю которого и наносят стеклянной палочкой на исследуемый препарат ив которое погружают (immergere по-латыни означает погружать, отсюда — иммерсионная, или погружная, система) соответственный, т. е. иммерсионный, объектив (при этом следует не спутать его с сухой системой). При таких условиях показатели преломления кедрового масла, покровного или предметного стекла и передней линзы оказываются одинаковыми (гомогенными). Это и определяет, как можно убедиться из рис. 51 и 52, проникновение в микроскоп большего числа лучей, чем у сухих систем, обеспечивая максимальную разрешающую способность объектива. Действительно, если у сухой ахроматической системы 3 (Рейхерта или Лейтца) нумерическая апертура равна 0,28, у системы 7 — 0,75, то у гомогенной иммерсионной системы 1/12 нумерическая апертура равна 1,25—1,30.


Микроскопы, снабженные гомогенными иммерсионными системами, которыми пользуются микробиологи, поскольку для изучения микроорганизмов необходимо обеспечить проникновение в наблюдаемый объект максимального количества световых лучей, всегда снабжаются осветительным аппаратом (конденсором) Аббе. Этот инструмент представляет собой систему чечевиц, собирающую отброшенные зеркалом лучи в виде конуса, вершина которого находится в плоскости исследуемого объекта, ярко освещая его.

При исследовании препарата (приготовленного так, как описано ниже) закрепляют предметное стекло зажимами и, поставив сначала слабую сухую систему 3, находят сделанный мазок (видна окрашенная полоса или пятно, где при этом увеличении микроорганизмы, само собой разумеется, еще не различимы), давая одновременно при открытой диафрагме передвижением зеркала наилучшее освещение в исследуемое поле зрения. Затем опускают тубус микроскопа винтом зубчатки до тех пор, пока передняя линза иммерсионного объектива коснется кедрового масла (удобнее и безопаснее для линзы следить за этим глазом сбоку), после чего, смотря обоими глазами в окуляр микроскопа, улавливают изображение уже при помощи микрометрического винта и затем медленно вращают этот винт до тех пор, пока изучаемый объект не будет четко виден. Объективы, само собой разумеется, должны быть вполне ввинчены в соответственные нарезки и при установке должны быть прямым продолжением тубуса.

Окрашенные препараты рассматривают при раскрытой диафрагме конденсора, а неокрашенные при закрытой или опуская конденсор. Зеркало должно собирать лучи своей плоской стороной; вогнутое зеркало применяется лишь в том случае, если пользуются близко находящимся искусственным светом. По окончании исследования иммерсионный объектив очищают от масла мягкой чистой тряпочкой. Конденсор слегка опускают или, наоборот, приподнимают тубус, чтобы избежать случайного повреждения объектива при столкновении с конденсором во время переноса микроскопа на хранение.

Категория: Практические занятия | Добавил: Irina (24.05.2013)
Просмотров: 1310 | Рейтинг: 0.0/0
Всего комментариев: 0
Имя *:
Email *:
Код *:
Вход на сайт
Поиск
Друзья сайта
  • Официальный блог
  • Сообщество uCoz
  • FAQ по системе
  • Инструкции для uCoz